LPCB - DiBEST
Il Laboratorio di Preparazione di Campioni Biologici (LPCB) si occuperà della produzione di singole proteine e di complessi proteici umani mediante biotecnologie basate su espressione in sistemi eterologhi come batteri e lieviti. A tale scopo, il laboratorio svolgerà attività di ricerca basata sull’ottimizzazione di procedure di clonaggio e di espressione in microrganismi di proteine e di complessi proteici con struttura ancora non identificata. Particolare attenzione sarà dedicata ad una classe di proteine che riveste attualmente una grande importanze scientifica per due principali ragioni: 1) sono ancora poco note a livello strutturale; 2) sono coinvolte in patologie umane molto diffuse come il cancro ed il diabete e rappresentano nuovi e più specifici bersagli farmacologici. Si tratta della super-famiglia SLC (SoLute Carriers) che include più di 500 membri nell’uomo, che attualmente sono oggetto di investimenti in ricerca e studi su larga scala.
- Ultracentrifuga
- Armadio congelatore
- Ultracongelatore verticale
- Centrifughe refrigerate ce-ivd
- Shaker incubatore
- Microcentrifuga refrigerata
- Bidistillatore
- Sistema pc-based di acquisizione e analisi immagini in chemiluminescenza e visibile
- Microscopio rovesciato
- Spettrofotometro
- Clonaggio cDNA in plasmidi d’espressione.
Amplificazione e clonaggio di cDNA codificanti proteine di trasporto umane (fino a 2 Kb). - Espressione eterologa di proteine di trasporto umane.
Studio delle condizioni di espressione di proteine umane in sistemi eterologhi (batteri, lieviti). Ottimizzazione del carico metabolico e delle condizioni di crescita dei microrganismi (composizione del terreno di coltura, temperatura, IPTG). - Purificazione di proteine di trasporto.
Purificazione delle proteine over-espresse in microrganismi mediante appropriate procedure cromatografiche. - Preparazione di campioni biologici.
Estrazione di DNA e RNA da cellule eucariotiche e da microrganismi. Preparazione di campioni di siero/plasma e isolamento di PBMC da sangue. - Creazione e mantenimento delle relative bio-banche.
Conservazione dell’intera collezione dei campioni biologici a -80°C e a -20°C - Stoccaggio delle colture cellulari.
Conservazione di linee cellulari eucariotiche e ceppi batterici a -80°C in opportuni mezzi di congelamento - Valutazione della qualità di linee cellulari umane.
Autenticazione di linee cellulari umane attraverso la determinazione del profilo STR di campioni di DNA. Controllo delle linee cellulari della presenza di contaminazioni da micoplasma.
| 2025 |
| Scalise M. et al. Lysine 204 is crucial for the antiport function of the human LAT1 transporter. Biochimica et Biophysica Acta – Bioenergetics. (2025) DOI n.d. |
| Prejanò M. et al. Lanthanides Gd and Tm can inhibit Carnitine/Acyl-Carnitine Transporter: insights from all-atoms simulations. ChemBioChem. (2025) DOI 10.1002/cbic.202401018 |
| Nocito M.C. et al. A targetable antioxidant-defence mechanism to EZH2 inhibitors enhances tumour-cell vulnerability to ferroptosis. Cell Death & Disease. (2025) DOI 10.1038/s41419-025-07607-y |
| 2024 |
| De Bartolo A. et al. A recombinant Fab of trastuzumab displays low cardiomyocyte cytotoxicity: key implication of FcγRIIA. Acta Pharmacologica Sinica. (2024) DOI 10.1038/s41401-024-01397-3 |
| Scalise M. et al. Structural insights into the bifunctional enzyme human FAD synthase. Structure. (2024) DOI 10.1016/j.str.2024.04.006 |
| Brunetti L.S. et al. OCTN1 (SLC22A4) as a target of heavy metals: its possible role in micro-plastic threats. Int. J. Mol. Sci.(2024) DOI 10.3390/ijms252313218 |
| Mazza T. et al. Carnitine traffic and human fertility. Biochemical Pharmacology. (2024) DOI 10.1016/j.bcp.2024.116565 |
| Mazza T. et al. Structural basis for modulation of MRP2 activity by phosphorylation and drugs. Nature Communications. (2024) DOI 10.1038/s41467-024-46392-8 |
| Ben Mariem O. et al. Atomistic description of the OCTN1 recognition mechanism via in silico methods. PLOS ONE. (2024) DOI 10.1371/journal.pone.0304512 |
| Currie M.J. et al. Structural and biophysical analysis of a Haemophilus influenzae TRAP transporter. eLife. (2024) DOI 10.7554/eLife.92307 |
| Crocco P. et al. The potential contribution of myomiRs miR-133a-3p/-133b/-206 dysregulation in cardiovascular-disease risk. Int. J. Mol. Sci.(2024) DOI 10.3390/ijms252312772 |
| Cerantonio A. et al. The role of mitochondrial copy number in neuro-degenerative diseases. Int. J. Mol. Sci.(2024) DOI 10.3390/ijms25116062 |
| 2023 |
| Crocco P. et al. Telomere shortening contributes to Alzheimer’s disease. Biology. (2023) DOI 10.3390/biology12101286 |
| 2022 |
| Paparazzo E. et al. A blood-based molecular clock for biological-age estimation. Cells. (2022) DOI 10.3390/cells12010032 |
| 2021 |
| Poulain M. et al. Specific features of the oldest old from Blue-Zones in Ikaria and Sardinia. Mech. Ageing Dev. (2021) DOI 10.1016/j.mad.2021.111543 |
| 2020 |
| Scalise M. et al. ATP modulates SLC7A5 (LAT1) synergistically with cholesterol. Scientific Reports. (2020) DOI 10.1038/s41598-020-73757-y |
LPCB – Laboratorio di Preparazione Campioni Biologici
LPCB - DiBEST
Cesare INDIVERI
Responsabile scientifico LPCB - DiBEST
Professore di I fascia
Dipartimento di Biologia, Ecologia e Scienze della Terra
cesare.indiveri@unical.it
0984/492939